小儿苯丙酮尿症的诊断需要结合临床症状、新生儿筛查和实验室检查，以下是详细的诊断步骤和检查方法：

临床诊断（初步判断）

1. 新生儿筛查

   • 所有新生儿在出生48-72小时后进行足跟血采集。

   • 检测血苯丙氨酸水平，＞120 μmol/L需进一步检查。

2. 临床表现

   • 未治疗患儿可能出现发育迟缓、癫痫、湿疹等。

   • BH4缺乏型可有肌张力低下、运动障碍。

实验室检查（确诊关键）

1. 血氨基酸分析

   • 确诊高苯丙氨酸血症（Phe＞360 μmol/L）。

   • 同时检测酪氨酸水平，计算Phe/Tyr比值。

2. 尿蝶呤分析

   • 鉴别BH4缺乏型（尿新蝶呤/生物蝶呤比值异常）。

3. BH4负荷试验

   • 口服BH4后监测血Phe下降情况。

   • 用于判断是否为BH4反应型PKU。

4. 基因检测

   • 明确PAH或BH4相关基因突变。

   • 有助于家系分析和产前诊断。

鉴别诊断（排除类似疾病）

诊断流程示例

1. 新生儿筛查阳性 → 血氨基酸分析（确诊高苯丙氨酸血症）→ 尿蝶呤分析/BH4负荷试验（分型）。

2. 临床疑似但筛查阴性 → 血氨基酸分析+基因检测。

注意事项

• 早期诊断至关重要，治疗延迟可导致不可逆脑损伤。

• BH4缺乏型需同时治疗神经递质缺乏。

通过上述检查，小儿苯丙酮尿症的诊断准确率接近100%。确诊后应立即开始治疗，并定期随访代谢控制情况。